Dunia misterius laboratorium embriologi

2023 Pengarang: Anita Thornton | [email protected]. Terakhir diubah: 2023-08-25 11:19

Fertilisasi in vitro (IVF) sekarang dianggap sebagai salah satu keberhasilan terbesar pengobatan modern. Ini adalah pengobatan paling efektif di klinik kesuburan.

Terdiri dari beberapa langkah, termasuk stimulasi ovarium, pengambilan sel telur, fertilisasi laboratorium dan transfer embrio ke dalam rongga rahim.

Setelah pengambilan sel telur oleh dokter, seluruh proses pembuahan dan pemantauan embrio berlangsung di dunia terbatas laboratorium embriologi sebelum transfer embrio.

Persiapan

Selama tusukan, ahli embriologi mengidentifikasi kompleks cumulo-oocyte (CCOs), ini adalah telur yang dikelilingi oleh lapisan sel (kumulus). Sekitar sepuluh CCO pulih rata-rata, tetapi jumlah ini bervariasi dari satu siklus ke siklus lainnya, tergantung pada respons terhadap stimulasi ovarium. CCO kemudian dimasukkan ke dalam inkubator pada suhu 37°C selama kurang lebih 2 jam.

Bersamaan dengan persiapan sel telur, persiapan sperma. Mereka disentrifugasi pada gradien kepadatan dan dicuci untuk memilih yang paling mobile dan paling indah secara morfologis.

Pertemuan

Ada duacara untuk mencapai pembuahan: IVF konvensional dan IVF dibantu dengan injeksi sperma intracytoplasmic (ICSI). Untuk IVF konvensional, CCO dibiakkan dengan spermatozoa dalam cawan petri yang ditempatkan dalam inkubator pada suhu 37°C semalaman. Terserah sperma untuk membuat jalan mereka untuk bertemu sel telur.

Untuk ICSI, embriolog lah yang menyelenggarakan pertemuan ini. Untuk ini, perlu menyiapkan telur: ini adalah dekoronisasi. Hal ini dicapai melalui tindakan mekanis dan enzimatik. Dengan demikian sel-sel kumulus akan terlepas dari ovum. Sebelum penyuntikan mikro, perlu untuk memeriksa kematangan telur berkat keberadaan badan kutub. Memang, telur yang belum matang tidak dapat dibuahi.

Sperma kemudian diamati di bawah mikroskop (kadang-kadang pada perbesaran tinggi: IMSI), untuk memilih kandidat terbaik. Ini juga terkadang bisa dilakukan oleh PICSI. Secara lebih konvensional, pemilihan sperma yang akan disuntik didasarkan pada beberapa kriteria. Mobilitas dan pergerakan adalah kriteria seleksi pertama karena merupakan jaminan sperma hidup. Kemudian, ukuran flagel, leher dan kepala spermatozoa dievaluasi dengan cermat. Setelah seleksi, ahli embriologi melumpuhkan spermatozoa dengan tindakan mekanis pada flagel dan mengaspirasinya menggunakan pipet injeksi mikro. Telur yang matang kemudian ditahan di tempatnya dengan pipet penahan dan spermatozoa disuntikkandalam terakhir ini. Gerakan teknis ini harus dikuasai dengan sempurna agar tidak melisiskan telur. Telur kemudian ditempatkan dalam inkubator 37°C semalaman.

Wahyu dan Pembagian

Tanda-tanda pembuahan terlihat keesokan harinya:

Pengusiran badan kutub kedua oleh sel telur menunjukkan bahwa ia telah menyelesaikan meiosisnya berkat kehadiran sperma. Telur tersebut kemudian haploid, memiliki 23 kromosom.

Keberadaan nukleus masing-masing dari kedua gamet juga merupakan tanda pembuahan. Ini karena materi genetik dari sperma dan sel telur masih berbeda pada tahap ini dan terkandung dalam dua struktur yang disebut pronuklei (gambar). Kedua pronukleus akan bermigrasi ke arah satu sama lain dan kromosom pria dan wanita akan berpasangan untuk menghasilkan satu set kromosom asli yang baru. Sel, yang disebut zigot, kemudian diploid, memiliki 23 pasang kromosom dan pembuahan selesai.

Pembelahan sel pertama, atau mitosis, terjadi 25 hingga 30 jam setelah pembuahan. Itu memungkinkan untuk menghasilkan sel lain yang identik dengan yang pertama, zigot kemudian lolos ke tahap embrio. Embrio kemudian mengalami serangkaian pembelahan sel. Pada hari kedua, embrio terdiri dari 2 hingga 6 sel dan 6 hingga 14 sel pada hari ke-3. Pada hari keempat, embrio, yang terdiri dari sekitar tiga puluh sel, memadat membentuk morula. Antara hari ke 4 dan 5, DNA jantan diekspresikan dan mempengaruhi struktur embrio. Sel-sel berdiferensiasi, mengatur ulang dan membentuk rongga: ini adalah tahap blastokista. Blastokista terdiri dari trofektoderm yang akan membentuk plasenta masa depan dan tombol embrionik yang akan membentuk janin masa depan.

Transfer

Transfer embrio biasanya dilakukan 3 atau 5 hari setelah pembuahan. Pilihan hari transfer tergantung pada evolusi dan kualitas embrio. Memang, seleksi dilakukan secara alami pada embrio, karena tidak semuanya layak. Jika satu atau dua embrio menonjol pada hari ke-3, maka transfer dilakukan pada hari itu. Jika tidak, transfer dilakukan pada hari ke 5.

Embrio yang dipilih dipasang di kateter dan kemudian diberikan ke dokter kandungan. Yang terakhir, di bawah bimbingan ultrasound, akan menempatkan embrio di rongga rahim. Setelah disimpan, embrio disandingkan dengan mikrovili uterus. Implantasi dilakukan beberapa hari setelah transfer.

Penting untuk diingat bahwa hukum Quebec melarang pemindahan dua embrio, untuk wanita di bawah usia 37 tahun. Kelebihan embrio dengan kualitas yang baik diawetkan dengan kriopreservasi.

Kriopreservasi

Kriopreservasi embrio telah dilakukan selama beberapa tahun menggunakan teknik vitrifikasi. Tingkat kelangsungan hidup telah meningkat pesat berkat metode ini yang terdiri dari mengosongkan sel-sel embrio dari air dan mengisinya dengan krioprotektan, sebelum memasukkannya ke dalam nitrogen cair (-196°). Dengan demikian, pembentukan kristal dalam sel dihindari. Embrio adalahsehingga membeku dalam waktu dan diawetkan dalam nitrogen sampai hangat.

Cécile Adam, PhD, ahli embriologi di Fertilys

Marjorie Disdier, M. Sc, embriolog di Fertilys

Véronique Blais, M. Sc, ahli embriologi di Fertilys